Principe de mètre chlorophylle
Selon l’absorption du spectre visible par le pigment chloroplastique extrait, l’absorbance est mesurée à une longueur d’onde donnée par un spectrophotomètre et le contenu de chaque pigment dans l’extrait peut être calculé par la formule. Conformément à la Loi de Beer-Lambert, l’absorbance A d’une solution colorée est proportionnelle à la concentration en soluté C et l’épaisseur L de la couche liquide, c'est-à-dire, A = αCL : constante proportionnelle α.
Lorsque la concentration de la solution est en unités de concentrations en pourcentage et l’épaisseur de la couche liquide est de 1 cm, α est le coefficient d’absorption de la substance. Le coefficient d’absorption de diverses solutions de substance colorée à différentes longueurs d’onde peut être obtenu en mesurant l’absorption de substances pures aux longueurs d’onde connues à différentes longueurs d’onde.
S’il y a plusieurs sortes de lumière absorbant les substances présentes dans la solution, l’absorption totale du liquide mélangé à une certaine longueur d’onde est égale à l’absorption complète de chaque composant à la longueur d’onde correspondante. Il s’agit de l’additivité de l’absorbance. Pour déterminer à extraire le contenu de la chlorophylle a, b et caroténoïdes dans le pigment chloroplastique, il faut uniquement déterminer l’absorbance A de l’extrait à trois longueurs d’onde spécifiques et selon la chlorophylle a, b et les caroténoïdes à cette longueur d’onde. Le coefficient d’absorption peut être utilisé pour déterminer la concentration. Afin d’éliminer l’interférence des caroténoïdes lorsque la chlorophylle a et b, la longueur d’onde de la lumière monochromatique de mesure utilisé sélectionne le pic maximum d’absorption de la chlorophylle dans le rouge.
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